Genotyping of Malassezia pachydermatis disclosed genetic variation in isolates from dogs in Colombia / Genotipagem de Malassezia pachydermatis revelou variação genética em isolados de cães na Colômbia

Malassezia pachydermatis is a lipophilic and lipid-dependent yeast mostly isolated from animals' skin; hence, it is regarded as a zoophilic species causing otitis externa in dogs. Aspects associated with its epidemiology and pathogenicity is a matter of interest. This study aimed to conduct a molecular characterization of 43 isolates of M. pachydermatis obtained from dogs with otitis externa. For this purpose, the 5.8S internal transcribed spacer 2 (ITS2) and D1/D2 26S rRNA regions were amplified, sequenced and analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) with AluI, CfoI, and BstF5I endonucleases. Phylogenetic analyses revealed that these isolates grouped with the sequence types I, IV and V, previously proposed for M. pachydermatis. Interestingly, we found a new polymorphic RFLP pattern using BstF5I, these isolates were associated with the sequence types IV and V, nevertheless an association between polymorphic RFLP patterns, and fosfolipase activity or canine population data was not observed. These findings underline the genetic diversity of M. pachydermatis and provide new insights about the epidemiology of this species in the analyzed population.(AU)

Malassezia pachydermatis é uma levedura lipofílica e dependente de lipídios, principalmente da pele de animais. Sendo, por essa razão, considerada uma espécie zoofílica e causadora de otite externa em cães. Neste sentido, aspectos associados à sua epidemiologia e patogenicidade constituem um tema de interesse científico. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular de 43 isolados de M. pachydermatis obtidos a partir de cães com otite externa. Para esta propósito, foram amplificadas, sequenciadas e analisadas com enzimas de restrição as regiões do gene 5.8S, do espaçador interno transcrito 2 (ITS2) e D1/D2 do 26S do rRNA pelo método RFLP, com as endonucleases AluI, CfOI e BstF5I. Análises filogenéticas revelaram que os isolados se agruparam com as sequências tipo I, IV e V de M. pachydermatis como já descrito anteriormente. De maneira interessante, se observou um novo RFLP polimórfico utilizando BstF5I. Os isolados que mostraram esse padrão foram associados com os padrões IV e V. No entanto, não foi observada associação entre padrões polimórficos de RFLP e atividade de fosfolipase ou dados da população canina. Estes resultados demonstram a diversidade genética de M. pachydermatis e fornecem novas perspectivas sobre a epidemiologia destas espécies na população analisada.(AU)

A randomized, double-blind, placebo-controlled study to assess the effect of an aqueous extract of Triticum aestivum on canine outer ear inflammation / Ensaio clínico, randomizado, duplo cego, para tratamento experimental de otite externa com extrato aquoso de Triticum aestivum

Outer ear otitis is a multifactorial acute or chronic inflammation of the ear canal, and treatment is often hampered by growing antibiotic resistance. Pre-clinical assessments have shown that an aqueous extract of Triticum aestiveum (wheat) can effectively reduce the symptoms associated with the disease. The purpose of this study was to assess, through a randomized, double-blind, placebo-controlled trial, the use of T. aestivum extract on canine external otitis. Thirty dogs (60 ears) met the criteria to be included in this study, and were randomly assigned a treatment group: placebo, extract, or positive control (C+). Ears were treated every day for seven days, and assessed before treatment (day zero), after treatment (day 7), and again on reassessment (day 14). Clinical assessment included: type of otitis; pinna conformation; presence or absence of itchiness, foul odor, and pain; presence of stenosis, erythema and cerumen. Furthermore, the evaluators assessed the temperature in each ear and the pH of the cerumen, and swabs were collected for bacterial and fungal isolation. All veterinarians treating and assessing the animals were blinded regarding the treatment groups. Results showed little difference in the treatment groups regarding clinical parameters. By day 7 ears treated with the C+ had elevated temperatures, when compared to the others (P<0.05), this was still true on day 14. Bacterial isolation had completely died out by day 7, however, on day fourteen the placebo group had six ears with bacterial infections, unlike the other two groups (P<0.05). The results generated herein show that a 25% wheat extract solution is effective in the reduction of clinical and microbiological parameters of external otitis, with better results when compared to a placebo, and similar results to the traditional, antibiotic/anti-inflammatory treatment.(AU)

A Otite Externa (OE) é uma inflamação aguda ou crônica do conduto auditivo dos cães apresentando várias etiologias e o uso de antimicrobianos vem apresentando resistência por inúmeras causas. O objetivo do presente estudo clínico, randomizado e duplo cego foi avaliar a utilização de Triticum aestivum no tratamento da otite externa em cães. Trinta cães com sintomas de otite externa foram distribuídos aleatoriamente em três grupos para tratamento (grupo placebo, grupo solução teste e grupo controle positivo), sendo tratados uma vez ao dia, durante sete dias e avaliados nos dias 0 (zero), sete, e 14 pós o tratamento, sendo submetidos a exame otológico, coleta de secreção auricular para cultura bacteriana e medição do pH do canal auditivo, sendo também realizada a aferição da temperatura do conduto auditivo. Como resultados foi observado que no dia sete houve um aumento da temperatura auricular do grupo controle positivo e manteve-se com a temperatura maior no dia 14 em relação aos demais grupos. Em relação a cultura bacteriana não houve diferença estatística nos grupos entre os dias zero e sete, porém na avaliação com 14 dias, percebeu-se crescimento bacteriano somente no grupo placebo. A solução com extrato aquoso de trigo 25% é eficaz na redução dos parâmetros clínicos e microbiológicos da otite externa, sendo uma nova opção para o tratamento dessa enfermidade em cães.(AU)

Perfil clínico e microbiológico de cães com e sem otoacaríase / Clinical and microbiological profile of dogs with and without otoacariasis

Os objetivos do estudo foram identificar a presença de microrganismos nos condutos auditivos dos cães através dos exames citológico e microbiológico, assim como avaliar a associação destes à otoacaríase e seus sinais clínicos. O diagnóstico da infestação por Otodectes cynotis foi realizado através de otoscopia bilateral e pela coleta de material e visualização do parasito sob microscópio esterioscópico, constituindo o exame parasitológico. Outras coletas de secreção otológica de cada orelha foram realizadas para confecção de lâminas para a citologia e para o isolamento microbiológico, sendo este último material coletado através de "swab" estéril. Dos 250 animais examinados, em 15 (6%) foi identificado o ácaro O. cynotis.Observou-se associação entre a presença do parasito e a ocorrência de otite clínica externa caracterizada especialmente por eritema auricular (P<0,001) e a produção excessiva de secreção otológica (P=0,0016), assim como a observação, pelos proprietários, de prurido ótico nos cães (P<0,001). Sugere-se a possibilidade de essas associações serem efeito da infestação. Houve também a associação (P<0,01) entre a otoacaríase e a ocorrência de microrganismos nos dois condutos auditivos de cada animal, detectados através da citologia. No entanto, não houve associação (P=0,04 e p=0,07) entre a presença do ácaro O. cynotis e a ocorrência de microrganismos no exame microbiológico das orelhas direita e esquerda, respectivamente.

The goals of this study were to identify microorganisms in dogs' ear canals through cytological and microbiological examination, and evaluate their association with otoacariasis and its clinical signs. Otodectes cynotis infestation diagnosis was achieved by bilateral otoscopy, and by parasite viewing on cerumem under stereoscopic microscope, representing the parasitological exam. Ear discharge was also collected from each canal to fix cytology slides and for microbiological isolation, but this last sample was collected with sterile swab. Among the 250 studied animals, 15 (6%) had ear mites. There was an association between the parasite and external clinical otitis specially as established by auricular erythema (P<0,001) and excessive production of ear discharge (P=0,0016), as well as ear pruritus observed by the owners (P<0,001). It has been suggested that these associations can be an effect of the infestations. There was also an association (P<0,01) between otoacariasis and microorganisms detected by cytological exam in both ear canals of each dog. However, there was no association (P=0,04 e P=0,07) between the presence of ear mite and microorganisms detected by microbiological exam of right and left ears.

Molecular characterization of Malassezia sympodialis and Malassezia furfur from cattle with and without otitis / Caracterização molecular de isolados de Malassezia sympodialis e Malassezia furfur provenientes de bovinos com e sem otite externa

A molecular study of Malassezia strains isolated from cattle with or without otitis was carried out by random amplified polymorphic DNA analysis (RAPD). DNA was extracted and purified from nine strains of Malassezia sympodialis and fourteen of Malassezia furfur. These microorganisms were collected from eight different bovine herds in Minas Gerais state, Brazil. The RAPD analysis and phenograms did not show the formation of genetically distinct groups among the strain isolated from cattle with or without otitis raised in the same herds. Genetic heterogeneity was observed among Malassezia strains from different geographic origins. These data suggest that genetically similar M. sympodialis and M. furfur strains found as members of the normal ear microbiota could become opportunistically active in the inflammatory process in cattle.

A caracterização molecular de amostras de Malassezia spp., isoladas de bovinos com e sem otite, foi realizada por meio da técnica do DNA polimórfico amplificado ao acaso (RAPD). DNAs de nove amostras de Malassezia sympodialis e quatorze de M. furfur foram extraídos e purificados. Essas amostras foram provenientes de oito diferentes rebanhos bovinos no estado de Minas Gerais, Brasil. A análise de RAPD e os fenogramas não revelaram a formação de grupos geneticamente distintos entre amostras isoladas de bovinos, criados no mesmo rebanho, com ou sem otite. Heterogeneidade genética foi observada entre amostras de diferentes origens geográficas. Os dados sugerem que isolados geneticamente semelhantes e membros da microbiota normal do ouvido podem participar, como oportunistas, no processo inflamatório do conduto auditivo externo de bovinos.

Isolation and identification of microorganisms present in 53 dogs suffering otitis externa

La otitis extrema es una enfermedad de etiología multifactorial que comúnmente afecta a los caninos. Representa una patología compleja que se asocia a infecciones causadas por bacterias y levaduras, y que muchas veces no responden a los tratamientos. El objetivo de este estudio fue aislar e identificar los microorganismos patógenos y no patógenos presentes en pacientes con otitis extrema. Esta investigación fue realizada sobre 53 pacientes caninos con otitis extrema que fueron atendidos en el Servicio de Consulta Extrema de la Policlínica Veterinaria de la Universidad del Zulia, los mismos presentaron signos clínicos tales como: eritema del canal auditivo, aumento de las secreciones, dolor, sacudidas constantes de la cabeza y prurito, siendo las secreciones purulentas y el prurito los más resaltantes. Las muestras fueron colectadas de los exudados presentes en la porción horizontal del canal auditivo. Diferentes grupos de bacterias fuerona aisladas en medios de cultivos, presentándose con mayor frecuencia Pseudonoma aeruginosa (22,22%), Proteus mirabilis (13,89%), Staphyloccocus aureus (12,50%), Staphylococcus epidermis (8,33%), Escherichia coli (5,56%) y Staphylococcus coagulada negativa (5,56 %). Por medio de la evaluación citológica se evidenció que Malassezia pachydermatis se encontró presente en un 68,80% de los casos estudiados. Las razas mayormente afectadas fueron Poodle (30,19%), mestizos (26,42%), Cockers spaniel (16,98%) y pastor alemán (9,49%); así mismo se observó mayor incidencia de otitis en caninos entre los 2 y 5 meses de edad (43,40%).

Malassezia pachydermatis e outros agentes infecciosos nas otites externas e dermatites em cäes / Malassezia pachydermatis and other infectious agents in external otitis and dermatitis in dogs

Malassezia pachydermatis (Pityrosporum canis) faz parte da microbiota da pele e quando ocorrem alteraçöes no microambiente local como aumento da umidade, da temperatura e do substrato, determinando uma elevaçäo do número de células, ocorre a transiçäo da forma comensal para o parasitismo. O objetivo deste trabalho foi determinar a prevalência da infecçäo por M. pachydermatis e outros agentes infecciosos nas otites externas e dermatites de cäes. Foram analisadas 78 amostras de cäes com otite, 36 amostras de cäes com o conduto auditivo normal e 24 com dermatite. Todas as amostras foram submetidas ao exame direto, cultivo em ágar sangue e ágar Sabouraud dextrose, acrescido de cloranfenicol e cicloheximida. Ao exame direto, 50 porcento das amostras de otite e 16,6 porcento das amostras de dermatite apresentaram numerosas células semelhante a M. pachydermatis, enquanto 83,3 porcento das amostras de ouvidos saudáveis apresentaram ausência de células com esta morfologia. M. pachydermatis foi isolada em 25 porcento das amostras do conduto auditivo normal, em 80,7 porcento das amostras de otite e em 37,5 porcento das amostras de dermatite. Foram também isolados das amostras de otite Staphylococcus intermedius, S. aureus, S. epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Proteus sp, Actinomyces sp, Streptococcus sp e Otodectes cynotis e das de dermatite Staphylococcus intermedius, S. aureus, S. epidermis, Microsporum canis, M. gypseum, Trychophyton sp e Demodex canis. M. pachydermatis foi o agente com maior prevalência nas otites externas e dermatites, sendo um agente oportunista que causa otite e dermatite quando há uma alteraçäo do microambiente.